电泳技术操作步骤详解，从准备到结果分析，新手必看教程

电泳技术是一种常用的生物化学实验技术，用于分离和分析生物大分子，如蛋白质、核酸等。对于新手来说，了解电泳技术的操作步骤至关重要。以下将从准备到结果分析，为您详细介绍电泳技术的操作步骤。

准备阶段

1. 实验器材与试剂

• 电泳槽
• 电泳电源
• 凝胶板
• 样品缓冲液
• 标准样品
• 加样缓冲液
• 标记染料
• 电泳胶
• 显色剂
• 显微镜

2. 实验步骤

2.1 准备凝胶板

1. 将凝胶板放在室温下平衡30分钟。
2. 使用铅笔在凝胶板边缘标记加样孔的位置。
3. 将凝胶板放入电泳槽中，确保凝胶板底部与电泳槽底部紧贴。

2.2 配制电泳胶

1. 按照电泳胶配方，称取相应质量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺。
2. 将称取的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶解于去离子水中，配制成电泳胶溶液。
3. 加入TEMED和AP，轻轻振荡混合，避免产生气泡。
4. 将电泳胶溶液倒入凝胶板中，静置一段时间，待凝胶凝固。

2.3 配制样品缓冲液

1. 称取相应质量的Tris、甘氨酸和SDS，溶解于去离子水中。
2. 加入溴酚蓝和二甲苯青FF，轻轻振荡混合。

2.4 准备标准样品

1. 取少量已知浓度的蛋白质或核酸，加入样品缓冲液。
2. 加热煮沸，使蛋白质或核酸变性。
3. 离心去除沉淀，取上清液作为标准样品。

2.5 准备待测样品

1. 取少量待测样品，加入样品缓冲液。
2. 加热煮沸，使蛋白质或核酸变性。
3. 离心去除沉淀，取上清液作为待测样品。

电泳操作

1. 加样

1. 将标准样品和待测样品分别加到凝胶板上的加样孔中。
2. 使用微量移液器，小心地将样品加到加样孔底部，避免气泡产生。

2. 电泳

1. 将电泳槽充满电泳缓冲液，确保凝胶板底部与电泳槽底部紧贴。
2. 将电泳电源打开，设置合适的电压和时间。
3. 观察电泳过程，待溴酚蓝指示剂到达凝胶板底部时，关闭电源。

3. 取出凝胶

1. 关闭电源，取出凝胶板。
2. 将凝胶板放入显色剂中，观察颜色变化。

结果分析

1. 比较标准样品和待测样品

1. 观察标准样品和待测样品在凝胶板上的位置，判断待测样品的分子量。
2. 计算待测样品的分子量。

2. 比较待测样品与已知样品

1. 观察待测样品与已知样品在凝胶板上的位置，判断待测样品的纯度。
2. 分析待测样品的纯度。

通过以上步骤，新手可以掌握电泳技术的操作方法。在实际操作过程中，请注意以下几点：

• 实验操作过程中，避免产生气泡。
• 加样时，注意样品的浓度和体积。
• 电泳过程中，注意观察溴酚蓝指示剂的位置。
• 结果分析时，结合标准样品和已知样品，判断待测样品的分子量和纯度。

祝您实验顺利！